砂仁为姜科植物阳春砂（Amomum villosum Lo-ur.）、绿壳砂（Amomum villosum T.L.Wu et Senjen） 或海南砂 （Amomum longiligularg T.L.wu）的干燥成熟果实，具有化湿开胃、温脾止泻、理气安胎等功能，主要用于湿浊中阻、脘痞不饥、脾胃虚寒、呕吐泄泻、妊娠恶阻、胎动不安等[1]。砂仁主要成分为挥发油类成分[2-4]，但其中也含有黄酮类成分[5]和多糖类成分[6]。

试验通过正交试验法优选药材粒度、溶剂倍数、浸泡时间、提取时间等影响因素，以提取得到挥发油中乙酸龙脑酯、提取物中总黄酮和总多糖提取率为考查指标，确定了砂仁药材综合利用的最佳工艺条件。通过对砂仁药材进行一次提取，同时得到砂仁挥发油、砂仁黄酮、砂仁多糖提取物，对砂仁药材进行了综合利用，具有显著的经济效益和社会效益。

1 试验材料

1.1 仪器与设备

6890型气相色谱仪，安捷伦科技公司产品；TU1901型紫外可见分光光度计，北京普析通用有限公司产品；AB135-S型电子天平，梅特勒-托利多公司产品；FA2004型电子天平，上海精密科学仪器有限公司产品；SK8200LHC型超声提取器，上海科导超声仪器有限公司产品。

1.2 材料与试剂

砂仁药材，由劲牌生物医药有限公司提供；乙酸龙脑酯对照品、芦丁对照品、葡萄糖对照品，由中国食品药品监督检定研究院提供；苯酚、浓硫酸、甲醇、乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠，均为分析纯；纯净水。

2 试验方法

2.1 乙酸龙脑酯含量测定

按《中国药典》2015版一部“砂仁”项下规定的方法测定。

2.2 总黄酮含量测定

2.2.1 对照品溶液的制备

精密称取5 mg芦丁标准品，用30%乙醇溶液溶解并定容至50 mL，作为对照品溶液。

2.2.2 标准曲线的制备

精密量取对照品溶液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，置于10 mL容量瓶中，然后加入0.3 mL 5%NaNO2溶液，混匀，放置6 min；加入0.3 mL 10%AL（NO3）3溶液，混匀，放置6 min；然后加入1 mol/L的NaOH溶液2 mL，混匀，放置15 min；用30%乙醇定容至10 mL，摇匀。以相应试剂为空白，于波长510 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、质量浓度为横坐标绘制标准曲线。

2.2.3 供试品溶液的制备

称取适量的提取物粉末样品，加入适量的50%乙醇至50 mL容量瓶中，摇匀，超声溶解，定容，放置，作为供试品溶液。

2.2.4 含量测定

精密吸取供试品溶液1.0 mL，置于10 mL容量瓶中，按照2.2.2的方法，自“加入0.3 mL 5%NaNO2溶液”起，依法测定吸光度，计算即得。

2.3 总多糖含量测定

2.3.1 对照品溶液的制备

精确称取105℃干燥至恒质量的葡萄糖对照品50 mg，置于50 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。再量取1 mL，置于50 mL容量瓶中，加水稀释至刻度。

2.3.2 标准曲线的制备

吸取葡萄糖标准液0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 mL，分别置于具塞比色管中，分别加水补至2.0 mL，分别精密加入5%苯酚溶液1 mL，摇匀，迅速精密加入浓硫酸5 mL，摇匀，置沸水浴中煮沸15 min，取出冷却至室温，以相应试剂为空白，于波长490 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、质量浓度为横坐标绘制标准曲线。

2.3.3 供试品溶液的制备

称取样品约15 mg，于50 mL容量瓶中，加入40 mL水，超声溶解、定容、过滤，作为供试品溶液备用。

2.3.4 显色测定

取上述供试品溶液1 mL，加水至2.0 mL，按照2.3.2的方法，自“精密加入5%苯酚溶液1 mL”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中葡萄糖的质量浓度，计算即得。

3 正交试验

3.1 因素水平设计

采用水加热提取，其影响因素主要有药材粒度、溶剂倍数、浸泡时间、提取时间[7]，采用L9（34）正交表优化提取条件，考查上述4个因素和3个水平。

因素与水平设计见表1。

表1 因素与水平设计水平 A样品粒度B溶剂倍数/倍1 2 3整粒捣碎粉碎10 12 15 C浸泡时间t/h 0.5 1.0 1.5 D提取时间t/h 4.0 5.0 6.0

3.2 样品制备

将砂仁药材分别按要求称取质量为100 g的样品9份，按正交试验表的条件分别进行加热提取，收集得到挥发油，准确测量其体积。

挥发油相关数据见表2。

表2 挥发油相关数据试验号 体积/mL 含量/mg·mL-1质量/mg 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1.4 1.5 1.9 2.8 2.3 2.9 3.8 3.9 3.4 380.9 418.9 396.7 467.4 484.0 463.9 477.7 493.7 502.9 533 628 754 1 308 1 113 1 345 1 815 1 926 1 710

文章来源：《中国资源综合利用》 网址: http://www.zgzyzhly.cn/qikandaodu/2020/1225/813.html